Эксклюзивные материалы студентам Рефераты, курсовые, дипломные
Этот вариант ИФА используют обычно для выявления специфических антител. В лунках панелей адсорбируют стандартный антиген и инкубируют с образцами сыворотки или другого биологического материала, полученного от больного (спинномозговая жидкость, слюна и др.). Специфические антитела, связавшиеся с антигеном на твердой фазе, выявляют с помощью антиглобулинового конъюгата. В зависимости от цели анализа используют разные антиглобулиновые реагенты, выявляющие антитела всех изотипов, либо специфичные к отдельным классам и подклассам иммуноглобулинов. Основное достоинство метода состоит в универсальности конъюгата. Один и тот же коньюгат может служить для выявления антител человека к самым разным антигенам в любых образцах. Реакция методически проста.
Основные этапы непрямого ИФА для определения антител:
1. Антиген адсорбируют на твердой фазе, затем отмывают от несвязавшихся компонентов.
2. Блокируют свободные месга связывания. Отмывают.
3. В лунки вносят исследуемый материал, инкубируют и затем проводят процедуру отмывки. Параллельно ставят пробы с положительным и отрицательным контролями.
4. Добавляют антиглобулиновый конъюгат в рабочем разведении, инкубируют, отмывают от несвязавшихся компонентов.
5. Вносят субстрат, инкубируют. По достижении оптимального уровня окрашивания в лунках с положительным контролем реакцию останавливают, добавляя стоп-раствор.
6. Измеряют количество продукта реакции на ИФА-ридере (рис.3).
При оптимальных условиях проведения анализа метод высокоспецифичен и чувствителен. Он позволяет выявлять нанограммовые количества антител в сыворотках исследуемых больных. Для получения удовлетворительных результатов необходима стандартизация реагентов и методических приемов. Этот вариант ИФА может также использоваться для тестирования моноклональных антител.
Смотрите также
Системная красная волчанка
1.
Системная
красная волчанка (СКВ,
болезнь Либмана-Сакса) (лат.
system lupus erythematosis) — симптомы, прогноз,
лечение
Системная
красная волчанка -
диффузное заболевание ...
Исторические сведения.
Впервые как самостоятельное
психическое расстройство биполярное аффективное расстройство было описано в
1854 году почти одновременно двумя французскими исследователями Ж. П. Фальре
(под названием « ...
Аутоимунные заболевания и неприятие родителей (теория). «Обратное развитие»
симптоматики в процессе выздоровления
В своей работе системного терапевта, Штефан Хаузнер
подчеркивает сходство принципов развития симптоматики и процесса выздоровления
при лечении методом симптомных расстановок и средствами г ...